1. 产品描述：

信励致和^®2×热启动探针法qPCR(dU)预混液是使用探针法进行qPCR的专用试剂。其中核心组分Taq DNA Polymerase是经过基因工程改造的的热启动DNA聚合酶，在常温下有效封闭了DNA聚合酶活性，配合优化的最适Buffer，能够有效抑制非特异性扩增，同时试剂中的dUTP/UDG酶能完全去除反应前的非特异性扩增产物的污染，从而提高PCR反应的特异性和灵敏度；同时本产品可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线，能对靶基因进行准确定量。本品是一种2×预混试剂，使用时加入相应的引物、探针、模板以及ddH₂O，使预混试剂工作浓度为1×即可。

2. 产品特点：

（1）特异性好。

（2）灵敏度高。

（3）稳定性好、有效防止污染。

1. 产品组分：

2. 储运条件：

-25℃～-15℃储存12个月，干冰运输，避免反复冻融。

3. 注意事项：

（1）本品尽量避免反复冻融。

（2）使用前请上下颠倒以混匀预混液，请勿涡旋震荡以免产生过多气泡引起反应体系体积失准，进而影响定量结果。预混液经混匀轻微离心后即可使用。

（3）本产品仅供科学研究使用。

产品稳定性检测：

将产品在不同温度条件下处理一段时间后使用VIC、CY5、ROX、FAM四种探针进行定量反应检测，结果显示定量效果均十分优异，实验数据有力地证明我司产品的稳定性好，重复效果佳。

1. 无Ct值或出现太晚？

原因分析：模板浓度过低；模板降解；扩增效率低；模板纯度质低，蛋白质、盐等杂质会影响PCR扩增和荧光检测；引物扩增效率低； 目的基因表达量低；反应循环数不够；qPCR 体系污染；探针设计不合理。

解决方案：建议适当增加模板用量；检查模板是否降解，使用新鲜制备的模板；优化反应条件，尝试三步法反应程序；重新制备高质量的模板或对模板进行稀释，降低杂质浓度；重新设计高质量引物；提高模板中目的基因含量，如使用特异性引物进行反转录；循环数一般为40；使用干净耗材，反应体系在超净台内进行配制；优化探针序列、长度及退火温度。

2. 实验重复性差？

原因分析：引物特异性低而导致错配；模板浓度过低；仪器误差；实验耗材质量差；qPCR 体系污染。

解决方案：建议重新设计引物；减少模板稀释倍数；选择适用仪器，定期校准仪器；选用质量好的耗材；使用干净耗材，反应体系在超净台内进行配制。