1. DNA条带分不开?
原因分析:电泳距离短;样品量较大时,DNA条带变粗,条带间不容易分开;凝胶存放时间较长,胶中的GelRed有一定降解,有效浓度降低,电泳时会导致拖尾;琼脂糖凝胶浓度不合适。
解决方案:建议适当延长电泳时间;适当降低上样量;使用新鲜配制的琼脂糖凝胶;较低的琼脂糖胶浓度不能有效分离小片段,较高的琼糖浓度不能有效分离大片段。
2. 电泳拖尾?
原因分析:加样量过多。
解决方案:适当减少加样体积或者加水稀释后再点样检测,会明显改善电泳结果。
3. 待测样品与DNA Marker大小不一致?
原因分析:不同DNA构象的电泳差异,如超螺旋构象的质粒电泳速度较快,线性化或开环质粒电泳速度明显慢。
解决方案:在检测环状核酸片段大小时,建议先将核酸进行线性化处理后再进行电泳。